Differential regulation of H<sup>+</sup>-ATPases in MDCK-C11 cells by aldosterone and vasopressin
Notice bibliographique
Résumé
The objective of the present work was to characterize the biochemical activity of the proton pumps present in the C11 clone of Madin-Darby canine kidney (MDCK) cells, akin to intercalated cells of the collecting duct, as well as to study their regulation by hormones like aldosterone and vasopressin. MDCK-C11 cells from passages 78 to 86 were utilized. The reaction to determine H+-ATPase activity was started by addition of cell homogenates to tubes contained the assay medium. The inorganic phosphate (P(i)) released was determined by a colorimetric method modified from that described by Fiske and Subbarow. Changes in intracellular calcium concentration in the cells was determined using the Ca2+-sensing dye fluo-4 AM. Homogenates of MDCK-C11 cells present a bafilomycin-sensitive activity (vacuolar H+-ATPase), and a vanadate-sensitive activity (H+/K+-ATPase). The bafilomycin-sensitive activity showed a pH optimum of 6.12. ATPase activity was also stimulated in a dose-dependent fashion as K+ concentration was increased between 0 and 50 mmol x L(-1), with an apparent K(m) for the release of P(i) of 0.13 mmol x L(-1) and Vmax of 22.01 nmol x mg(-1) x min(-1). Incubation of cell monolayers with 10(-8) mol x L(-1) aldosterone for 24 h significantly increased vacuolar H+-ATPase activity, an effect prevented by 10(-5) mol x L(-1) spironolactone. Vacuolar H+-ATPase activity was also stimulated by 10(-11) mol x L(-1) vasopressin, an effect prevented by a V1 receptor-specific antagonist. This dose of vasopressin determined a sustained rise of cytosolic ionized calcium. We conclude that (i) homogenates of MDCK-C11 cells present a bafilomycin-sensitive (H+-ATPase) activity and a vanadate-sensitive (H+/K+-ATPase) activity, and (ii) vacuolar H+-ATPase activity is activated by aldosterone through a genomic pathway and by vasopressin through V1 receptors.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».