Molecular and Biochemical Characterization of an Enzyme Responsible for the Formation of Hypericin in St. John's Wort (Hypericum perforatum L.)
Notice bibliographique
Résumé
A major gene termed Hyp-1 encoding for hypericin (HyH) biosynthesis was cloned and characterized from Hypericum perforatum (St. John's wort) cell cultures. H. perforatum leaves are widely used as an herbal remedy in the treatment of mild to moderate depression. Hypericin, a photosensitive and red-colored naphthodianthrone, has been reported as the bioactive compound responsible for reversing the depression symptoms. In this study a novel red-color-based colony screening method for examining a cDNA library (lambda-TriplEX2) derived from H. perforatum cell cultures revealed the gene responsible for hypericin biosynthesis after the administration of emodin, a precursor of hypericin. The selected clones were expressed in Escherichia coli (BM 25.8 line) and were further screened for biosynthesis of emodin to hypericin, which resulted in an 84.6% conversion. The full-length cDNA sequence of Hyp-1 is 782 nucleotides in length with an open reading frame of 477 nucleotides coding for a protein of 159 amino acids, with a 45.1% homology to Bet.v.1 class allergens. Reverse transcriptase-PCR analysis showed high levels of Hyp-1 transcripts in dark-grown cell cultures compared with the levels in light-grown cell cultures and leaves. Southern blot analysis showed the presence of a single Hyp-1 gene in H. perforatum. Furthermore, Hyp-1 was expressed with a His6 affinity tag linked to its N terminal region using the expression vector pET-28a, and the recombinant Hyp-1 protein was able to convert HyH from emodin under in vitro conditions. HyH product inhibition was observed with emodin analogues, rhein, rhein methyl ester, and DNA3-55-1. Our results demonstrate a direct and complex conversion of emodin to HyH that is solely catalyzed by Hyp-1, a Bet.v.1 class allergen from H. perforatum.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».