Cysteine-Poor Region-Specific EpCAM Monoclonal Antibody Recognizing Native Tumor Cells with High Sensitivity
Notice bibliographique
Résumé
EpCAM is a ∼40 kDa transmembrane glycoprotein. EpCAM overexpression is a popular trait of almost all carcinomas and is considered as a targeted cancer immunotherapy as well as a practical marker for circulating tumor cells (CTC). Its extracellular part (EpEx) consists of an N-terminal EGF-like (EGF) domain, a TY-like (TY) domain, and an uncharacterized cysteine-poor (CP) region. Most commercially available murine monoclonal antibodies (MAbs) to EpCAM, such as HEA 125 and VU-1D9, bind to the small EGF domain. In a previous study, we introduced iCeap (intact CTC enumeration and analysis procedure), keeping cellular integrity during the whole process. Unlike the CellSearch(®) CTC Test, iCeap enables downstream molecular analysis from detected CTC. Use of two EpCAM MAbs, one for immunomagnetic enrichment of rare CTC from blood samples and the other for labeling, is a concept of iCeap while an ideal MAb pair has not been found. In order to obtain a better MAb that recognizes a part of EpEx as different from EGF domain, we established a mouse hybridoma clone producing a new EpCAM MAb, KIJY2. Fluorophore-conjugated KIJY2 and HEA 125-FITC can concomitantly stain the tumor cell line LNCaP within indistinguishable cellular compartments (i.e., the cell surface). Epitope mapping reveals that KIJY2 binds to the CP region. The epitope for KIJY2 is sensitive to paraformaldehyde fixation, but native cells including MCF-7 (EpCAM high-expressing cell line) and PC-3 (EpCAM low and heterogeneously expressing cell line) are detected by KIJY2. In particular, KIJY2 detects all PC-3 cells regardless of their EpCAM expression levels. Therefore, KIJY2 and an EGF domain-directed MAb are a promising pair to form the EpCAM sandwich in iCeap. We demonstrate that KIJY2 incorporated into iCeap yielded favorable results in spike-in experiments of MCF-7 and PC-3.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,004 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».