Stabilization of Lysozyme Mass Extracted From Lotrafilcon Silicone Hydrogel Contact Lenses
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
PURPOSE: Lysozyme deposits extracted from lotrafilcon silicone hydrogel (SH) contact lens materials demonstrate a loss in total mass as a function of storage time when assessed by Western blotting. This loss represents a potential source of error when quantifying total lysozyme deposition on SH lenses. The purpose of this study was to devise a method whereby lysozyme mass would be preserved over time to allow for its accurate quantitation after its removal from SH lenses. METHODS: Lysozyme deposits from 12 human worn lotrafilcon lenses were extracted using a 50:50 mixture of 0.2% trifluoroacetic acid and acetonitrile. Extracts were lyophilized to dryness, then resuspended in either reconstitution buffer (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA) or modified reconstitution buffer (reconstitution buffer + 0.9% saline). BIOSTAB Biomolecule Storage Solution (Sigma-Aldrich) was added to one half of the samples from each buffer group. One microliter of each of the samples was immediately subjected to sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis and Western blotting, whereas the remaining volume was aliquoted and stored at -20 degrees C or -70 degrees C and subjected to the same procedures after 48 h of storage. Comparison of lysozyme band intensity in stored vs. fresh samples enabled calculation of percentage mass loss of lysozyme. RESULTS: Samples stored at -20 degrees C in reconstitution buffer with no BIOSTAB demonstrated a 33% loss in mass over 48 h of storage. Identical samples stored at -70 degrees C in modified reconstitution buffer with BIOSTAB added demonstrated <1% loss in mass. Statistical analysis indicated that buffer composition (p < 0.001), storage temperature (p = 0.04), and addition of BIOSTAB (p < 0.001) were all important in controlling loss of mass over time. CONCLUSION: We have optimized a procedure whereby the extracted mass of lysozyme deposits found on lotrafilcon SH lenses can be preserved, thus enabling accurate quantitation after extraction and resuspension.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle