Mechanism of transfer of NO from extracellular <i>S</i> -nitrosothiols into the cytosol by cell-surface protein disulfide isomerase
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
N-dansylhomocysteine (DnsHCys) is quenched on S-nitrosation. The product of this reaction, N-dansyl-S-nitrosohomocysteine, is a sensitive, direct fluorogenic substrate for the denitrosation activity of protein disulfide isomerase (PDI) with an apparent K(M) of 2 microM. S-nitroso-BSA (BSA-NO) competitively inhibited this reaction with an apparent K(I) of 1 microM. The oxidized form of DnsHCys, N,N-didansylhomocystine, rapidly accumulated in cells and was reduced to DnsHCys. The fluorescence of DnsHCys-preloaded human umbilical endothelial cells and hamster lung fibroblasts were monitored as a function of extracellular BSA-NO concentration via dynamic fluorescence microscopy. The observed quenching of the DnsHCys fluorescence was an indirect measure of cell surface PDI (csPDI) catalyzed denitrosation of extracellular S-nitrosothiols as decrease or increase in the csPDI levels in HT1080 fibrosarcoma cells correlated with the rate of quenching and the PDI inhibitors, 5,5'-dithio-bis-3-nitrobenzoate and 4-(N-(S-glutathionylacetyl) amino)phenylarsenoxide inhibited quenching. The apparent K(M) values for denitrosation of BSA-NO by csPDI ranged from 12 microM to 30 microM. Depletion of membrane N(2)O(3) with the lipophylic antioxidant, vitamin E, inhibited csPDI-mediated quenching rates of DnsHCys fluorescence by approximately 70%. The K(M) for BSA-NO increased by approximately 3-fold and V(max) decreased by approximately 4-fold. These findings suggest that csPDI catalyzed NO released from extracellular S-nitrosothiols accumulates in the membrane where it reacts with O2 to produce N(2)O(3). Intracellular thiols may then be nitrosated by N2O3 at the membrane-cytosol interface.
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Prédiction distillée sur la base complète
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Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
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