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Enregistrement W2083495149 · doi:10.1074/jbc.l111.333609

Inconvenient Truths for PRMT6 Kinetic Studies

2012· letter· en· W2083495149 sur OpenAlexaff
Adam Frankel

Notice bibliographique

RevueJournal of Biological Chemistry · 2012
Typeletter
Langueen
DomaineBiochemistry, Genetics and Molecular Biology
ThématiqueCancer-related gene regulation
Établissements canadiensUniversity of British Columbia
Organismes subventionnairesnon disponible
Mots-clésScopusStereochemistryChemistryBiochemistry

Résumé

récupéré en direct d'OpenAlex

Obianyo and Thompson assigned a rapid equilibrium random mechanism to PRMT6 in their recent article (1.Obianyo O. Thompson P.R. Kinetic mechanism of protein arginine methyltransferase 6 (PRMT6).J. Biol. Chem. 2012; 287: 6062-6071Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (33) Google Scholar). We disagree with their conclusions and assessment of our work (2.Lakowski T.M. Frankel A. A kinetic study of human protein arginine N-methyltransferase 6 reveals a distributive mechanism.J. Biol. Chem. 2008; 283: 10015-10025Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (69) Google Scholar). PRMT crystal structures solved in complex with substrates and/or substrate analogs contradict their kinetic mechanism and support our sequential ordered mechanism in which S-adenosyl-l-methionine (AdoMet) binds first and S-adenosyl-l-homocysteine (AdoHcy) dissociates last from the enzyme because AdoMet/AdoHcy-binding pockets become buried underneath two α-helical segments when occupied (3.Zhang X. Zhou L. Cheng X. Crystal structure of the conserved core of protein arginine methyltransferase PRMT3.EMBO J. 2000; 19: 3509-3519Crossref PubMed Scopus (268) Google Scholar, 4.Yue W.W. Hassler M. Roe S.M. Thompson-Vale V. Pearl L.H. Insights into histone code syntax from structural and biochemical studies of CARM1 methyltransferase.EMBO J. 2007; 26: 4402-4412Crossref PubMed Scopus (102) Google Scholar, 5.Sack J.S. Thieffine S. Bandiera T. Fasolini M. Duke G.J. Jayaraman L. Kish K.F. Klei H.E. Purandare A.V. Rosettani P. Troiani S. Xie D. Bertrand J.A. Structural basis for CARM1 inhibition by indole and pyrazole inhibitors.Biochem. J. 2011; 436: 331-339Crossref PubMed Scopus (78) Google Scholar). Obianyo and Thompson did not reconcile their kinetic mechanism with any structural or biophysical studies of PRMTs. In our previous work, we used a MS-based assay to measure AdoHcy or methylated peptides where appropriate to directly quantify these products (2.Lakowski T.M. Frankel A. A kinetic study of human protein arginine N-methyltransferase 6 reveals a distributive mechanism.J. Biol. Chem. 2008; 283: 10015-10025Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (69) Google Scholar). Our product inhibition studies for the monomethylated substrate provided solid evidence to support a sequential ordered mechanism. In contrast to our method, Obianyo and Thompson employed a gel-based assay to indirectly measure radioactivity associated with peptide methylation, where phosphorimages or raw densitometry data are not available for scrutiny. Their double-reciprocal plots consistently show line patterns indicative of the type of product inhibition claimed that do not fit with most of the data points displayed. The unfortunate consequence of their interpretation is a proposed kinetic mechanism for PRMT6 unsupported by their own experimental results and what has been reported in the literature (2.Lakowski T.M. Frankel A. A kinetic study of human protein arginine N-methyltransferase 6 reveals a distributive mechanism.J. Biol. Chem. 2008; 283: 10015-10025Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (69) Google Scholar, 3.Zhang X. Zhou L. Cheng X. Crystal structure of the conserved core of protein arginine methyltransferase PRMT3.EMBO J. 2000; 19: 3509-3519Crossref PubMed Scopus (268) Google Scholar, 4.Yue W.W. Hassler M. Roe S.M. Thompson-Vale V. Pearl L.H. Insights into histone code syntax from structural and biochemical studies of CARM1 methyltransferase.EMBO J. 2007; 26: 4402-4412Crossref PubMed Scopus (102) Google Scholar, 5.Sack J.S. Thieffine S. Bandiera T. Fasolini M. Duke G.J. Jayaraman L. Kish K.F. Klei H.E. Purandare A.V. Rosettani P. Troiani S. Xie D. Bertrand J.A. Structural basis for CARM1 inhibition by indole and pyrazole inhibitors.Biochem. J. 2011; 436: 331-339Crossref PubMed Scopus (78) Google Scholar).

Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.

Comment cette classification a été obtenuedéplier

Prédiction distillée sur la base complète

Imitation des enseignants

Ni prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.

score de la tête « metaresearch » (Codex)0,000
score de la tête « metaresearch » (Gemma)0,000
Version: codex-gemma-dda1882f352aStatut de validation: machine_predicted_unvalidated
Catégories candidatesMéta-épidémiologie (sens strict), Intégrité de la recherche
Catégories consensuellesaucune
DomaineSignal candidat: aucune · Signal consensuel: aucune
Devis d'étudeSignal candidat: Sans objet · Signal consensuel: Sans objet
GenreSignal candidat: Empirique · Signal consensuel: Empirique
Score de désaccord entre enseignants0,150
Score d'incertitude au seuil1,000

Scores Codex et Gemma par catégorie

CatégorieCodexGemma
Métarecherche0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens strict)0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens large)0,0010,001
Bibliométrie0,0000,000
Études des sciences et des technologies0,0000,000
Communication savante0,0000,000
Science ouverte0,0000,000
Intégrité de la recherche0,0020,001
Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger)0,0000,000

Scores machine (provisoires)

Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.

Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.

Tête enseignante Opus0,037
Tête enseignante GPT0,295
Écart entre enseignants0,258 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
Statut de validationscore_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle

Classification

machine, non validée

Prédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.

Devis d'étudeSans objet
Domainenon disponible
GenreEmpirique

Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».

En bref

Citations1
Publié2012
Routes d'admission1
Résumé présentoui

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