Keratin contribution to cellular mechanical stress response at focal adhesions as assayed by laser tweezers
Notice bibliographique
Résumé
The ability of adherent cells to sense and adapt to a mechanical stress generated at focal adhesions (FAs) largely occurs through the integrin-mediated interaction between the cytoskeleton, namely actin microfilaments, and extracellular matrix elements, like fibronectin. Here we assessed the contribution of keratin 8 and 18 (K8/K18) intermediate filaments (IFs) in simple epithelial cells in response to a mechanical stress applied on integrins at FAs. To this end, we used monolayer cultures of K8-knockdown H4-II-E-C3 (shK8b1) rat hepatoma cells and their K8/K18-containing counterparts (H4ev). The stress was generated with a laser tweezers mediated force applied on a fibronectin-coated polystyrene bead attached to integrins alpha5/beta1 forming FAs. Measurement of the bead displacement allowed assessment of the viscoelastic response at FAs and the associated surface membrane stiffness. Notably, the loss of K8/K18 IFs in shK8b1 cells revealed an immediate reduction in bead displacements characteristic of a sudden increased in the FA elastic stiffness, incompatible with the K8/K18 IF intrinsic viscoelastic features, but in line with an induced perturbation of the mechanotransduction signals triggered at integrins. In addition, actin microfilament disruption, and to a lesser extent microtubule disruption, led to prominent decreases in the elastic stiffness of FAs, thus identifying actin-MFs and MTs as modulators of the time-dependent FA stiffening in both H4ev cells and shK8b1 cells, in response to mechanical stress. On technical ground, the laser tweezers offer a tool of choice to delineate the K8/K18 IF-mediated modulation of cytoskeletal versus signaling activities at FAs in epithelial cells in response to mechanical stress.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».