67 GLUTATHIONE ADDED TO CULTURE MEDIUM AND CRYOPROTECTANT SOLUTION ENHANCE THE VIABILITY OF EMBRYONIC STEM CELLS AFTER THAWING
Notice bibliographique
Résumé
We have attempted to improve cell viability of embryonic stem cells (ESC) after freezing and thawing, and, as a result, an efficient cryoprotectant for cryopreserving of mouse ESC was selected in a previous study. This study was subsequently conducted to examine whether the addition of glutathione (GSH), an antioxidant, to the optimized culture medium and cryoprotectant solution could improve post-thaw cell viability of ESC. Embryonic stem cells of a mouse E14 cell line were subcultured 5 times and subsequently employed for the cryopreservation. Dulbecco’s minimal essential medium, to which 100 µm GSH was added or not, was used as a basal medium for ESC culture and a freezing solution. Dimethyl sulfoxide (10%, v/v) and ethylene glycol (10%, v/v) were used as cryoprotectants. In experiment 1, intracytoplasmic concentrations of reactive oxygen species (ROS) in ESCs subcultured and cryopreserved in GSH-free and GSH-containing medium was measured immediately after cryopreservation. A significant (P < 0.0001) decrease in ROS level was detected in ESC cultured and cryopreserved in GSH-containing medium compared with GSH-free medium. Cell viability was subsequently assessed immediately and 72 h after thawing in experiment 2. Improved post-thaw viability was detected when GSH-containing media were employed. There were no significant differences of the viability between fresh and frozen–thawed ESC, regardless of time of assessment immediately (P > 0.1325; 0.653 v. 0.604) and 72 h (P > 0.2998; 0.671 v. 0.626) after treatment. However, there was lower post-thaw viability at 0 h (P < 0.0024; 0.671 v. 0.544) and at 72 h (P < 0.0138; 0.742 v. 0.59) in ESC cultured and cryopreserved in GSH-free medium than that in ESC cultured and cryopreserved with GSH-containing medium. These results demonstrated that use of GSH as an antioxidant affects the level of ROS and promotes post-thaw survival of frozen ESC.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».