Overexpression, purification, and partial characterization of Saccharomyces cerevisiae processing alpha glucosidase I
Notice bibliographique
Résumé
The gene encoding yeast processing alpha glucosidase I, CWH41, was overexpressed in Saccharomyces cerevisiae AH22, resulting in a 28-fold increase in expression of the soluble form of the enzyme. The soluble enzyme results from proteolytic cleavage between residues Ala 24 and Thr 25 of the transmembrane sequence of the membrane-bound form of the enzyme. This cleavage could be partially inhibited by addition of leupeptin and pepstatin during the enzyme isolation. The enzyme was purified to a final specific activity of 8550 U/mg protein using a combination of ammonium sulfate precipitation, anion exchange, concanavalin A, and gel filtration chromatography. The soluble form of the enzyme is a monomer with a molecular weight of 98 kDa by SDS-PAGE, and 89 kDa by gel filtration. The molecular weight decreased by approximately 5 kDa after treatment with N-glycosidase F, indicating that it is a glycoprotein. Soluble glucosidase I was sensitive to diethyl pyrocarbonate and not affected by N-ethylmaleimide, suggesting that mechanistically it is more similar to the plant than the mammalian form of the enzyme.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».