Identification of Novel Markers That Demarcate the Nucleolus during Severe Stress and Chemotherapeutic Treatment
Notice bibliographique
Résumé
The nucleolus, the ribosomal factory of the cell, has emerged as a key player that regulates many aspects of cell biology. Several thousand proteins associate at least transiently with nucleoli, thereby generating a highly dynamic compartment with a protein profile which is sensitive to changes in cell physiology and pharmacological agents. Powerful tools that reliably demarcate the nucleoli are a prerequisite to measure their composition and activities. Previously, we developed quantitative methods to measure fluorescently labeled molecules in nucleoli. While these tools identify nucleoli under control and mild stress conditions, the accurate detection of nucleolar boundaries under harsh experimental conditions is complicated by the lack of appropriate markers for the nucleolar compartment. Using fluorescence microscopy we have now identified new marker proteins to detect nucleoli upon (a) severe stress and (b) drug treatments that trigger a pronounced reorganization of nucleoli. Our results demonstrate that nucleolin is an ideal marker to delimit nucleoli when cells are exposed to heat or oxidative stress. Furthermore, we show for the first time that cellular apoptosis susceptibility protein (CAS) and human antigen R protein (HuR) are excluded from nucleoli and can be employed to delimit these compartments under severe conditions that redistribute major nucleolar proteins. As proof-of-principle, we used these markers to demarcate nucleoli in cells treated with pharmacological compounds that disrupt the nucleolar organization. Furthermore, to gain new insights into the biology of the nucleolus, we applied our protocols and quantified stress- and drug-induced changes in nucleolar organization and function. Finally, we show that CAS, HuR and nucleolin not only identify nucleoli in optical sections, but are also suitable to demarcate the nucleolar border following 3D reconstruction. Taken together, our studies present novel marker proteins that delimit nucleoli with high confidence under a variety of experimental settings.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».