Bovine herpesvirus-1 US3 protein kinase: critical residues and involvement in the phosphorylation of VP22
Notice bibliographique
Résumé
The US3 gene product of bovine herpesvirus-1 (BoHV-1) is a protein kinase that is expressed early during infection and capable of autophosphorylation. By examining differentially labelled US3 moieties by co-immunoprecipitation, we demonstrated that the protein kinase interacts with itself in vitro, which supports autophosphorylation by US3. Based on its homology to other serine/threonine protein kinases, we defined two highly conserved lysines in US3, at position 195 within the ATP-binding pocket and at position 282 within the catalytic loop; altering either residue resulted in kinase-dead mutants, demonstrating that these two residues are critical for the catalytic activity of BoHV-1 US3. During immunoprecipitation experiments, US3 interacted weakly with VP22, another tegument protein of BoHV-1. Furthermore, VP22 co-localized with US3 inside the nucleus in BoHV-1-infected cells. In vitro kinase assays demonstrated that VP22 is phosphorylated not only by US3, but also by the cellular casein kinase 2 (CK2) protein. The selective CK2 protein kinase inhibitor, 2-dimethylamino-4,5,6,7-tetrabromo-1H-benzimidazole (DMAT) and the less specific CK2 inhibitor Kenpaullone reduced VP22 phosphorylation, while CK1, protein kinase C or protein kinase A inhibitors did not affect phosphorylation. When US3 was included with VP22 in the kinase assay in the presence of DMAT, a low level of VP22 phosphorylation was observed. These data demonstrate that BoHV-1 VP22 interacts with both CK2 and US3, and that CK2 is the major kinase phosphorylating VP22, with US3 playing a minor role.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
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Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».