Regulation of Kir4.1 and AQP4 expression and stability at the basolateral domain of epithelial MDCK cells by the extracellular matrix
Notice bibliographique
Résumé
The proper targeting of ion channels to specialized domains is crucial for cell function. Kir4.1, the inwardly rectifying potassium channel, and aquaporin-4 (AQP4), the type 4 water-permeable channel, are localized at the basolateral domain of polarized epithelial cells; however, the mechanisms involved in their localization have yet to be determined. In this study, we investigated the role of the extracellular matrix in the localization of these channels in polarized Madin-Darby canine kidney (MDCK) cells. MDCK cells expressing green fluorescent protein-Kir4.1 or -AQP4 were cultured on laminin-1 or fibronectin and examined by confocal microscopy and cell surface biotinylation to assess plasma membrane expression of Kir4.1 and AQP4. Our data show that laminin-1 and fibronectin induce a significant increase in cell surface expression of both channels at the basolateral domain. Using fluorescence recovery after photobleaching, we demonstrate that laminin-1 and fibronectin reduce the diffusion rates of these channels. Finally, we show that the laminin receptor dystroglycan is important for cell surface expression of Kir4.1 but not AQP4. However, laminin-1 increases cell surface expression of both channels in cells deficient for dystroglycan, indicating that other receptors are involved. Indeed, RGD-containing peptides, which inhibit fibronectin binding to certain integrins, prevent the fibronectin-induced increase in Kir4.1 and AQP4 cell surface expression and reverse the laminin- and fibronectin-induced reduction in both channels' diffusion rates. Similarly, the αvβ3-integrin function-blocking antibody alters the reduction of AQP4 diffusion rates induced by both laminin and fibronectin, suggesting that αvβ3-integrin plays a role in the stabilization of APQ4 at the basolateral domain of epithelial cells.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».