Interaction of Autographa californica Multiple Nucleopolyhedrovirus Cathepsin Protease Progenitor (proV-CATH) with Insect Baculovirus Chitinase as a Mechanism for proV-CATH Cellular Retention
Notice bibliographique
Résumé
The insect baculovirus chitinase (CHIA) and cathepsin protease (V-CATH) enzymes cause terminal host insect liquefaction, enhancing the dissemination of progeny virions away from the host cadavers. Regulated and delayed cellular release of these host tissue-degrading enzymes ensures that liquefaction starts only after optimal viral replication has occurred. Baculoviral CHIA remains intracellular due to its C-terminal KDEL endoplasmic reticulum (ER) retention motif. However, the mechanism for cellular retention of the inactive V-CATH progenitor (proV-CATH) has not yet been determined. Signal peptide cleavage occurs upon cotranslational ER import of the v-cath-expressed protein, and ER-resident CHIA is needed for the folding of proV-CATH. Although this implies that CHIA and proV-CATH bind each other in the ER, the putative CHIA-proV-CATH interaction has not been experimentally verified. We demonstrate that the amino-terminal 22 amino acids (aa) of Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) preproV-CATH are responsible for the entry of proV-CATH into the ER. Furthermore, the CHIA-green fluorescent protein (GFP) and proV-CATH-red fluorescent protein (RFP) fusion proteins colocalize in the ER. Using monomeric RFP (mRFP)-based bimolecular fluorescence complementation (BiFC), we determined that CHIA and proV-CATH interact directly with each other in the ER during virus replication. Moreover, reciprocal Ni/His pulldowns of His-tagged proteins confirmed the CHIA-proV-CATH interaction biochemically. The reciprocal copurification of CHIA and proV-CATH suggests a specific CHIA-proV-CATH interaction and corroborates our BiFC data. Deletion of the CHIA KDEL motif allowed for premature CHIA secretion from cells, and proV-CATH was similarly prematurely secreted from cells along with ΔKDEL-CHIA. These data suggest that CHIA and proV-CATH interact directly with each other and that this interaction aids the cellular retention of proV-CATH.
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Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
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Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».