The I-TevI Nuclease and Linker Domains Contribute to the Specificity of Monomeric TALENs
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
Precise genome editing in complex genomes is enabled by engineered nucleases that can be programmed to cleave in a site-specific manner. Here, we fused the small, sequence-tolerant monomeric nuclease domain from the homing endonuclease I-TevI to transcription-like activator effectors (TALEs) to create monomeric Tev-TALE nucleases (Tev-mTALENs). Using the PthXo1 TALE scaffold to optimize the Tev-mTALEN architecture, we found that choice of the N-terminal fusion point on the TALE greatly influenced activity in yeast-based assays, and that the length of the linker used affected the optimal spacing of the TALE binding site from the I-TevI cleavage site, specified by the motif 5'-CNNNG-3'. By assaying activity on all 64 possible sequence variants of this motif, we discovered that in the Tev-mTALEN context, I-TevI prefers A/T-rich triplets over G/C-rich ones at the cleavage site. Profiling of nucleotide requirements in the DNA spacer that separates the CNNNG motif from the TALE binding site revealed substantial, but not complete, tolerance to sequence variation. Tev-mTALENs showed robust mutagenic activity on an episomal target in HEK 293T cells consistent with specific cleavage followed by nonhomologous end-joining repair. Our data substantiate the applicability of Tev-mTALENs as genome-editing tools but highlight DNA spacer and cleavage site nucleotide preferences that, while enhancing specificity, do confer moderate targeting constraints.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle