A cationic lumen in the Wzx flippase mediates anionic O‐antigen subunit translocation in <i>Pseudomonas aeruginosa</i> PAO1
Notice bibliographique
Résumé
Heteropolymeric B-band O-antigen (O-Ag) biosynthesis in Pseudomonas aeruginosa PAO1 follows the Wzy-dependent pathway, beginning with translocation of undecaprenyl pyrophosphate-linked anionic O-Ag subunits (O units) from the inner to the outer leaflets of the inner membrane (IM). This translocation is mediated by the integral IM flippase Wzx. Through experimentally based and unbiased topological mapping, our group previously observed that Wzx possesses many charged and aromatic amino acid residues within its 12 transmembrane segments (TMS). Herein, site-directed mutagenesis targeting 102 residues was carried out on the TMS and loops of Wzx, followed by assessment of each construct's ability to restore B-band O-Ag production, identifying eight residues important for flippase function. The importance of various charged and aromatic residues was highlighted, predominantly within the TMS of the protein, revealing functional 'hotspots' within the flippase, particularly within TMS2 and TMS8. Construction of a tertiary structure homology model for Wzx indicated that TMS2 and TMS8 line a central cationic lumen. This is the first report to describe a charged flippase lumen for mediating anionic O-unit translocation across the hydrophobic IM.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».