C-terminal splicing of NTPDase2 provides distinctive catalytic properties, cellular distribution and enzyme regulation
Notice bibliographique
Résumé
The present study provides functional characterization of alternative splicing of the NTPDase2 (ecto-nucleoside triphosphate diphosphohydrolase-2) involved in the regulation of extracellular nucleotide concentrations in a range of organ systems. A novel NTPDase2beta isoform produced by alternative splicing of the rat NTPDase2 gene provides an extended intracellular C-terminus and distinguishes itself from NTPDase2alpha isoform in gaining several intracellular protein kinase CK2 (casein kinase 2) phosphorylation sites and losing the intracellular protein kinase C motif. The plasmids containing NTPDase2alpha or NTPDase2beta cDNA were used to stably transfect Chinese-hamster ovary-S cells. Imaging studies showed that NTPDase2alpha was predominantly membrane-bound, whereas NTPDase2beta had combined cell surface and intracellular localization. alpha and beta isoforms showed variations in divalent cation dependence and substrate specificity for nucleoside-5'-triphosphates and nucleoside-5'-diphosphates. NTPDase2beta exhibited reduced ATPase activity and no apparent ADPase activity. NTPDase2 isoforms demonstrated similar sensitivity to inhibitors such as suramin and pyridoxal phosphate-6-azophenyl-2',4'-disulphonic acid, and differential regulation by protein kinases. NTPDase2beta was up-regulated by intracellular protein kinase CK2 phosphorylation, whereas NTPDase2alpha activity was down-regulated by protein kinase C phosphorylation. The results demonstrate that alternative coding of the intracellular C-terminal domain contributes distinctive phenotypic variation with respect to extracellular nucleotide specificity, hydrolysis kinetics, protein kinase-dependent intracellular regulation and protein trafficking. These findings advance the molecular physiology of this enzyme system by characterizing the contribution of the C-terminal domain to many of the enzyme's signature properties.
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Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».