Tools for micropatterning epithelial cells into microcolonies on transwell filter substrates
Notice bibliographique
Résumé
Despite the importance of epithelial tissue in most major organs there have been limited attempts to tissue engineer artificial epithelium. A key feature of mature epithelium is the presence of an apical-basal polarization, which develops over 7-20 days in culture. Currently, the most widely used 2D system to generate polarized epithelium in vitro involves the filter insert culture system, however this system is expensive, laborious and requires large numbers of cells per sample. We have developed a set of micropatterning techniques to spatially control the organization of epithelial cells into microsheets on filter inserts under the culture conditions necessary to induce epithelial cell polarization. Micropatterning improves cell uniformity within each microsheet, allows multiple sheet analysis on one filter insert, and reduced cell number requirements. We describe an agarose patterning method that allows maintenance of cell patterns for over 15 days, the time necessary to induce apical-basal polarization. We also describe a Parafilm™ patterning method that allows patterning for 5 to 15 days depending on cell type and only allows the generation of stripes and circular microsheets. The parafilm™ method however is extremely straightforward and could be easily adopted by any laboratory without the need of access to specialized microfabrication equipment. We also demonstrate that micropatterning epithelial cells does not alter the localization of the apical-basal marker ZO-1 or the formation of cilia, a marker of epithelium maturation. Our methods provide a novel tool for studying epithelial biology in polarized epithelium microsheets of controlled size.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».