Additional roles of a peripheral loop-loop interaction in the Neurospora VS ribozyme
Notice bibliographique
Résumé
Many RNAs contain tertiary interactions that contribute to folding the RNA into its functional 3D structure. In the VS ribozyme, a tertiary loop-loop kissing interaction involving stem-loops I and V is also required to rearrange the secondary structure of stem-loop I such that nucleotides at the base of stem I, which contains the cleavage-ligation site, can adopt the conformation required for activity. In the current work, we have used mutants that constitutively adopt the catalytically permissive conformation to search for additional roles of the kissing interaction in vitro. Using mutations that disrupt or restore the kissing interaction, we find that the kissing interaction contributes ~1000-fold enhancement to the rates of cleavage and ligation. Large Mg(2+)-dependent effects on equilibrium were also observed: in the presence of the kissing interaction cleavage is favored >10-fold at micromolar concentrations of Mg(2+); whereas ligation is favored >10-fold at millimolar concentrations of Mg(2+). In the absence of the kissing interaction cleavage exceeds ligation at all concentrations of Mg(2+). These data provide evidence that the kissing interaction strongly affects the observed cleavage and ligation rate constants and the cleavage-ligation equilibrium of the ribozyme.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».