Identification, Characterization, and Application of a Recombinant Antigen for the Serological Investigation of Feline Hemotropic Mycoplasma Infections
Notice bibliographique
Résumé
In felids, three hemotropic mycoplasma species (hemoplasmas) have been described: Mycoplasma haemofelis, "Candidatus Mycoplasma haemominutum," and "Candidatus Mycoplasma turicensis." In particular, M. haemofelis may cause severe, potentially life-threatening hemolytic anemia. No routine serological assays for feline hemoplasma infections are available. Thus, the goal of our project was to identify and characterize an M. haemofelis antigen (DnaK) that subsequently could be applied as a recombinant antigen in a serological assay. The gene sequence of this protein was determined using consensus primers and blood samples from two naturally M. haemofelis-infected Swiss pet cats, an experimentally M. haemofelis-infected specific-pathogen-free cat, and a naturally M. haemofelis-infected Iberian lynx (Lynx pardinus). The M. haemofelis DnaK gene sequence showed the highest identity to an analogous protein of a porcine hemoplasma (72%). M. haemofelis DnaK was expressed recombinantly in an Escherichia coli DnaK knockout strain and purified using Ni affinity, size-exclusion, and anion-exchange chromatography. It then was biochemically and functionally characterized and showed characteristics typical for DnaKs (secondary structure profile, thermal denaturation, ATPase activity, and DnaK complementation). Moreover, its immunogenicity was assessed using serum samples from experimentally hemoplasma-infected cats. In Western blotting or enzyme-linked immunosorbent assays, it was recognized by sera from cats infected with M. haemofelis, "Ca. Mycoplasma haemominutum," and "Ca. Mycoplasma turicensis," respectively, but not from uninfected cats. This is the first description of a full-length purified recombinant feline hemoplasma antigen that can readily be applied in future pathogenesis studies and may have potential for application in a diagnostic serological test.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».