Transient expression in <i>Nicotiana benthamiana</i> fluorescent marker lines provides enhanced definition of protein localization, movement and interactions <i>in planta</i>
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Notice bibliographique
Résumé
Here, we report on the construction of a novel series of Gateway-compatible plant transformation vectors containing genes encoding autofluorescent proteins, including Cerulean, Dendra2, DRONPA, TagRFP and Venus, for the expression of protein fusions in plant cells. To assist users in the selection of vectors, we have determined the relative in planta photostability and brightness of nine autofluorescent proteins (AFPs), and have compared the use of DRONPA and Dendra2 in photoactivation and photoconversion experiments. Additionally, we have generated transgenic Nicotiana benthamiana lines that express fluorescent protein markers targeted to nuclei, endoplasmic reticulum or actin filaments. We show that conducting bimolecular fluorescence complementation assays in plants that constitutively express cyan fluorescent protein fused to histone 2B provides enhanced data quality and content over assays conducted without the benefit of a subcellular marker. In addition to testing protein interactions, we demonstrate that our transgenic lines that express red fluorescent protein markers offer exceptional support in experiments aimed at defining nuclear or endomembrane localization. Taken together, the new combination of pSITE-BiFC and pSITEII vectors for studying intracellular protein interaction, localization and movement, in conjunction with our transgenic marker lines, constitute powerful tools for the plant biology community.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle