Enhanced Bovine Herpesvirus Type 1 Neutralization by Multimerized Single-Chain Variable Antibody Fragments Regardless of Differential Glycosylation
Notice bibliographique
Résumé
Single-chain variable antibody fragments (scFvs) with a 2-amino-acid linker capable of multimerization as di-, tri-, or tetrabodies that neutralize bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) in vitro were constructed and expressed in Pichia pastoris. In contrast to the monomeric form, multimeric scFvs had a higher virus neutralization potency, as evidenced by a 2-fold increase in their ability to neutralize BoHV-1 due to avidity effects. Mass spectrum (quadrupole time of flight [Q-TOF]) analyses of multimeric scFv demonstrated extensive heterogeneity due to differential cleavage, variable glycosylation (1 to 9 mannose residues), and the incorporation of minor unidentified adducts. Regardless of the differential glycosylation patterns, the scFvs recognized non-gB or -gE target viral epitopes in the BoHV-1 envelope fraction in a Western blot and also neutralized BoHV-1 in infected Madin-Darby kidney (MDBK) cells in vitro. Indirect evidence for the noncovalent multimerization of scFv was the presence of a major peak of multimerized scFv without a His tag (due to differential cleavage) in the Q-TOF profile, unlike monomeric scFv, which copurified with normally His-tagged scFv and recognized the target antigen. Overall, differentially glycosylated recombinant scFvs against BoHV-1 with a short linker (2 amino acids) are capable of assembly into functional multimers that confer high avidity, resulting in increased virus neutralization in vitro compared to that of monovalent scFv with a long (18-amino-acid) flexible linker. Overall, recombinant multimerized scFv5-2L potentially provides a high-potency therapeutic and immunodiagnostic reagent against BoHV-1, which is suitable for passive immunization and topical application.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».