Flow Cytometric Quantification of T Cell Proliferation and Division Kinetics in Woodchuck Model of Hepatitis B
Notice bibliographique
Résumé
Woodchucks infected with woodchuck hepatitis virus (WHV) represent the closest natural animal model to study the immunopathogenesis of liver injury caused by essentially noncytopathic, highly human specific hepatitis B virus (HBV). The importance of antiviral T cell response in induction of hepatitis and in control of HBV replication has been demonstrated. However, the understanding of how these responses contribute to the development of different immunomorphological forms of liver disease and their outcomes remain elusive. In this study, we established and standardized a flow cytometry assay using peripheral blood mononuclear cells labeled with carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester (CFSE) to assess WHV-specific and mitogen-driven T lymphocyte proliferative responses in woodchucks. The assay is of significantly greater sensitivity than the adenine incorporation assay currently used when applied to measure either WHV-specific T cell responses in acute (P < 0.001) and chronic (P < 0.03) viral hepatitis or those induced by mitogens in both healthy and WHV-infected animals. It also provides a new type of information, not previously available, characterizing the strength of woodchuck T cell proliferative reactivity by measuring cell division rates. The study shows that woodchuck PBMC labeled with CFSE exhibit light scatter and fluorescence profiles compatible to those of human PBMC, allowing quantitation and deconvolution of the flow cytometric data by applying the existing analytical softwares. The availability of this novel assay should facilitate a more precise and comprehensive evaluation of hepadnavirus-specific and generalized T cell responses in experimental WHV hepatitis.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».