Determination of Essential and Variable Residues in Pediocin PA-1 by NNK Scanning
Notice bibliographique
Résumé
Pediocin PA-1 is an antimicrobial peptide (called bacteriocin) that shows inhibitory activity against the food-borne pathogen Listeria monocytogenes. To elucidate which residue(s) is responsible for this function, the antimicrobial activities of pediocin PA-1 mutants were evaluated and compared. Each of the 44 native codons was replaced with the NNK triplet oligonucleotide in a technique termed NNK scanning, and 35 mutations at each position were examined for antimicrobial activities using a modified colony overlay screening method. As a consequence, the functional responsibility of each residue was estimated by counting the number of active mutants, allowing us to identify candidate essential/variable residues. Activity was abrogated by many of the mutations at residues Y2, G6, C9, C14, C24, W33, G37, and C44, indicating that these residues may be essential. In contrast, activity was retained by almost all versions harboring mutations at K1, T8, G10, S13, G19, N28, and N41, indicating that these are functionally redundant residues. Sequence analysis revealed that only the wild type was active and 14 and 11 substitutions were inactive at G6 and C14, respectively, while 12 and 11 substitutions were active and 2 and 0 substitutions were inactive at T8 and K1, respectively. These findings suggest that NNK scanning is effective for determining essential and variable residues in pediocin PA-1, leading to an elucidation of structure-function relationships and to improvements in the antimicrobial function efficiently by peptide engineering.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».