Expression of the sodium–<i>myo</i>‐inositol cotransporter SMIT2 at the apical membrane of Madin‐Darby canine kidney cells
Notice bibliographique
Résumé
Myo-inositol is a compatible osmolyte used by cells which are challenged by variations in extracellular osmolarity, as in the renal medulla. In order to accumulate large quantities of this polyol, cells rely on Na(+)-dependent transporters such as SMIT1. We have recently identified a second Na(+)-myo-inositol cotransporter, SMIT2, which presents transport characteristics corresponding to those recently described for the apical membrane of renal proximal tubules. In order to further characterize this transport system, we transfected Madin-Darby canine kidney (MDCK) cells with rabbit SMIT2 cDNA and selected a stable clone with a high expression level. The accumulation of radiolabelled myo-inositol by this cell line is 20-fold larger than that seen in native MDCK cells. The affinity for myo-inositol of MDCK cells transfected with SMIT2 is slightly lower (K(m)= 334 microm) than that found in voltage-clamped Xenopus laevis oocytes expressing SMIT2 (K(m)= 120 microm). Transport studies performed using semipermeable filters showed complete apical targeting of the SMIT2 transporter. This apical localization of SMIT2 was confirmed by transport studies on purified rabbit renal brush border membrane vesicles (BBMVs). Using a purified antibody against SMIT2, we were also able to detect the SMIT2 protein (molecular mass = 66 kDa) in Western blots of BBMVs purified from SMIT2-transfected MDCK cells. SMIT2 activity was also shown to be stimulated 5-fold when submitted to 24 h hypertonic treatment (+200 mosmol l(-1)). The SMIT2-MDCK cell line thus appears to be a promising model for studying SMIT2 biochemistry and regulation.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».