Detection of Mycobacterium‐specific interferon‐gamma‐producing human T lymphocytes by flow cytometry
Notice bibliographique
Résumé
Flow cytometry has proven to be a useful tool for the investigation of cytokine synthesis by selected cell subpopulations. While most reports have used mitogen stimulation or long-term cultures with antigen, we describe here a novel method to allow the detection of rare mycobacterial antigen-specific cytokine synthesizing cells within one day. The most important feature of this method is the use of an FITC-conjugated isotype-matched control antibody to identify and exclude cells which fluoresce non-specifically. With this technique, we demonstrate interferon-gamma (IFN-gamma) staining in 785 cells per 1 x 10(5) T cells counted, in mycobacterial antigen-stimulated peripheral blood mononuclear cells from a BCG-vaccinated subject. In comparison, only 14 IFN-gamma-staining T cells were seen in the cultures not stimulated by mycobacterial antigen. Less than 10 cells per 1 x 10(5) T cells are stained by an irrelevant control antibody. Specific responses are detectable after 12 h of in vitro culture, and peak at 24 h. In volunteer health care workers, IFN-gamma staining correlated with IFN-gamma production using a published ELISPOT assay (r=0.927). IFN-gamma staining was also higher in PBMC from mantoux skin test-positive volunteers, compared to cells from skin test-negative subjects (p=0.0045). Flow cytometry following short-term culture can thus be used for enumeration of antigen-specific IFN-gamma synthesizing cells.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».