Dissecting the molecular control of endothelial NO synthase by caveolin-1 using cell-permeable peptides
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Notice bibliographique
Résumé
In endothelia, NO is synthesized by endothelial NO synthase (eNOS), which is negatively regulated by caveolin-1 (Cav-1), the primary coat protein of caveolae. We show that delivery of Cav-1 amino acids 82-101 (Cav) fused to an internalization sequence from Antennapedia (AP) blocks NO release in vitro and inflammation and tumor angiogenesis in vivo. To characterize the molecular mechanism by which the AP-Cav peptide and Cav-1 mediate eNOS inhibition, we subdivided the Cav portion of AP-Cav into three domains (Cav-A, -B, and -C), synthesized five overlapping peptides (AP-Cav-A, -AB, -B, -BC, and -C), and tested their effects on eNOS-dependent activities. Peptides containing the Cav-B domain (amino acids 89-95) induced time- and dose-dependent inhibition of eNOS-dependent NO release in cultured endothelial cells, NO-dependent inflammation in the ear, and hydraulic conductivity in isolated venules. Alanine scanning of AP-Cav-B revealed that Thr-90 and -91 (T90,91) and Phe-92 (F92) are crucial for AP-Cav-B- and AP-Cav-mediated inhibition of eNOS. Mutation of F92 to A92 in the Cav-1 cDNA caused the loss of eNOS inhibitory activity compared with wild-type Cav-1. These data highlight the importance of amino acids 89-95 and particularly F92 in mediating eNOS inhibition by AP-Cav and Cav-1.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle