Probing the Role of the Linker in Ferrocene–ATP Conjugates: Monitoring Protein Kinase Catalyzed Phosphorylations Electrochemically
Notice bibliographique
Résumé
The synthesis and electrochemical properties of ferrocene conjugates are presented for the purpose of investigating adenosine 5'-[γ-ferrocenoylalkyl] triphosphate (1 a-4 a, ferrocene (Fc)-ATP) as co-substrates for phosphorylation reactions. Compounds 1 a-4 a were synthesized, purified by HPLC, and characterized by NMR spectroscopy and mass spectrometry. In solution, all Fc-ATP bioconjugates exhibit a reversible one-electron redox process with a half-wave potential (E(1/2)) in the 390-430 mV range, peak separations (ΔE(p)) in the 40-70 mV range, and the peak current ratio (i(pa)/i(pc)) near unity. The peptide-modified surface Glu-Gly-Ile-Tyr-Asp-Val-Pro was used to study the sarcoma-related protein (Src) kinase activity by employing the Fc-ATP bioconjugates as co-substrates. Subsequent kinase-catalyzed transfer of the γ-Fc-phosphate group to the tyrosine residues of the surface-bound peptides was characterized by a formal potential (E°) ≈390 mV (vs. Ag/AgCl). The Fc-coverage, estimated by time-of-flight secondary-ion mass spectrometry (TOF-SIMS) and cyclic voltammetry (CV), suggested validity of Fc-ATP conjugates as kinase co-substrates. Depending on the length of the alkyl spacer of the Fc-ATP conjugate, different current densities were obtained, pointing to a direct correlation between the two. Molecular modeling revealed that the structural constraint imposed by the short alkyl spacer (1 a) causes a steric congestion and negatively affects the outcome of phosphorylation reaction. An optimal analytical response was obtained with the Fc-ATP conjugates with linker lengths longer than six CH(2) groups.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
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Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».