Identification of a complete methane monooxygenase operon from soil by combining stable isotope probing and metagenomic analysis
Pourquoi ce travail est dans la base
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Notice bibliographique
Résumé
Stable isotope probing (SIP) allows the isolation of nucleic acids from targeted metabolically active organisms in environmental samples. In previous studies, DNA-SIP has been performed with the one-carbon growth substrates methane and methanol to study methylotrophic organisms. The methylotrophs that incorporated the labelled substrate were identified with polymerase chain reaction and sequencing of 16S rRNA and 'functional genes' for methanotrophs (mxaF, pmoA, mmoX). In this study, a SIP experiment was performed using a forest soil sample incubated with (13)CH(4), and the (13)C-DNA was purified and cloned into a bacterial artificial chromosome (BAC) plasmid. A library of 2300 clones was generated and most of the clones contained inserts between 10 and 30 kb. The library was probed for key methylotrophy genes and a 15.2 kb clone containing a pmoCAB operon, encoding particulate methane monooxygenase, was identified and sequenced. Analysis of the pmoA sequence suggested that the clone was most similar to that of a Methylocystis sp. previously detected in this forest soil. Twelve other open reading frames were identified on the clone, including the gene encoding beta-ribofuranosylaminobenzene 5'-phosphate synthase, which is involved in the biosynthesis of the 'archaeal' C(1)-carrier, tetrahydromethanopterin, which is also found in methylotrophs. This study demonstrates that relatively large DNA fragments from uncultivated organisms can be readily isolated using DNA-SIP, and cloned into a vector for metagenomic analysis.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle