Functional reconstitution of an eicosanoid-modulated Cl<sup>−</sup>channel from bovine tracheal smooth muscle
Notice bibliographique
Résumé
We describe the biochemical properties of an eicosanoid-modulated Cl- channel and assess the mechanisms by which the epoxyeicosatrienoic acids (EETs) alter both its unitary conductance and its open probability (P(o)). After a purification protocol involving wheat-germ agglutinin affinity and anion-exchange chromatography, the proteins were sequentially inserted into liposomes, which were then fused into PLBs. Functional and biochemical characterization tests confirm that the Cl- channel is a 55-kDa glycosylated monomer with voltage- and Ca(2+) concentration-independent activity. 5,6- and 8,9-EET decreased the conductance of the native channel (control conductance: 70 +/- 5 pS in asymmetrical 50 mM trans/250 mM cis CsCl) in a concentration-dependent manner, with respective 50% inhibitory concentration values of 0.31 and 0.42 microM. These regioisomers similarly decreased the conductance of the purified channel (control conductance value: 75 +/- 5 pS in asymmetrical 50 mM trans/250 mM cis CsCl), which had been stripped of its native proteic and lipidic environment. On the other hand, 5,6- and 8,9-EETs decreased the P(o) of the native channel with respective 50% inhibitory concentration values of 0.27 and 0.30 microM but failed to alter the P(o) of the purified protein. Thus we suggest that the effects of these EETs on channel conductance likely result from direct interactions of EET- anions with the channel pore, whereas the alteration of P(o) requires a lipid environment of specific composition that is lost on solubilization and purification of the protein.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».