Novel Pathway of Salicylate Degradation by <i>Streptomyces</i> sp. Strain WA46
Notice bibliographique
Résumé
A novel salicylate-degrading Streptomyces sp., strain WA46, was identified by UV fluorescence on solid minimal medium containing salicylate; trace amounts of gentisate were detected by high-pressure liquid chromatography when strain WA46 was grown with salicylate. PCR amplification of WA46 DNA with degenerate primers for gentisate 1,2-dioxygenase (GDO) genes produced an amplicon of the expected size. Sequential PCR with nested GDO primers was then used to identify a salicylate degradation gene cluster in a plasmid library of WA46 chromosomal DNA. The nucleotide sequence of a 13.5-kb insert in recombinant plasmid pWD1 (which was sufficient for the complete degradation of salicylate) showed that nine putative open reading frames (ORFs) (sdgABCDEFGHR) were involved. Plasmid pWD1 derivatives disrupted in each putative gene were transformed into Streptomyces lividans TK64. Disruption of either sdgA or sdgC blocked salicylate degradation; constructs lacking sdgD accumulated gentisate. Cell extracts from Escherichia coli DH5 alpha transformants harboring pUC19 that expressed each of the sdg ORFs showed that conversions of salicylate to salicylyl-coenzyme A (CoA) and salicylyl-CoA to gentisyl-CoA required SdgA and SdgC, respectively. SdgA required CoA and ATP as cofactors, while NADH was required for SdgC activity; SdgC was identified as salicylyl-CoA 5-hydroxylase. Gentisyl-CoA underwent spontaneous cleavage to gentisate and CoA. SdgA behaved as a salicylyl-CoA ligase despite showing amino acid sequence similarity to an AMP-ligase. SdgD was identified as a GDO. These results suggest that Streptomyces sp. strain WA46 degrades salicylate by a novel pathway via a CoA derivative. Two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis and reverse transcriptase-PCR studies indicated that salicylate induced expression of the sdg cluster.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».