In vitro regeneration and genetic transformation of the berberine‐producing plant, <i>Thalictrum flavum</i> ssp. <i>glaucum</i>
Notice bibliographique
Résumé
Protocols have been developed for the in vitro regeneration and Agrobacterium-mediated genetic transformation of meadow rue, Thalictrum flavum ssp. glaucum. Ten-day-old seedlings were bisected along the embryonic axis and the cotyledons were co-cultured with various Agrobacterium tumefaciens strains for 3 days. The cotyledons were cultured on a shoot induction medium (B5 salts and vitamins, 30 g l-1 sucrose, 2 mg l-1 kinetin, and 3 g l-1 Gelrite) containing 25 mg l-1 hygromycin B as the selection agent and 250 mg l-1 timentin to facilitate the elimination of Agrobacterium. Only the oncogenic A. tumefaciens strains A281 and C58 produced transgenic T. flavum callus tissues. A281 was the most effective strain producing hygromycin-resistant callus on 85% of the explants. Transgenic callus was subcultured on the shoot induction medium every 2 weeks. After 12 weeks, hygromycin-resistant shoots that formed on explants exposed to strain A281 were transferred to a root induction medium (B5 salts and vitamins, 25 mg l-1 hygromycin B, 250 mg l-1 timentin, and 3 g l-1 Gelrite). Detection of the beta-glucuronidase (GUS) gene using a polymerase chain reaction assay, the high levels of GUS mRNA and enzyme activity, and the cytohistochemical localization of GUS activity confirmed the genetic transformation of callus cultures and regenerated plants. The transformation process did not alter the normal content of berberine in transgenic roots or cell cultures; thus, the reported protocol is valuable to study the molecular and metabolic regulation of protoberberine alkaloid biosynthesis.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».