A high-throughput Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation system for molecular breeding and functional genomics of rice (Oryza sativa L.)
Notice bibliographique
Résumé
Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation is the preferred method for genetic transformation of rice. Here we provide a comprehensive and high-through-put protocol for Agrobacterium-mediated transformation of rice for generating the large numbers of transgenic plants that are required for functional analysis and for evaluating traits of agronomic importance. In a project designed to produce nitrogen use efficient rice plants, we refined/improved several factors including optimization of conditions for inducing vir genes prior to transformation, infection and co-cultivation medium for better interaction of target tissues with Agrobacterium. These optimizations supported not only the survival of co-cultured calli in high frequency, but also the production of multiple resistant cell lines per co-cultured embryogenic and nodular callus. In addition, improvements in plant tissue culture, selection and regeneration media has enabled us to produce large numbers of transgenic rice plants containing genes of agronomical importance. Partial desiccation and ABA treatment to hygromycin-resistant callus tissue significantly (P<0.05) enhanced both regeneration frequency and regeneration of transgenic plantlets per callus tissue. Regeneration frequency was further improved by optimizing the concentration of copper sulphate in the regeneration medium. The majority of the transgenic plants obtained using this improved protocol displayed a normal phenotype and the gene of interest was inherited by the progeny in a Mendelian fashion. Homozygous plants of selected lines showed stable phenotypes both in soil and hydroponic conditions even after five generations. Availability of such a high-throughput Agrobacterium-mediated transformation system will improve future opportunities for rice genetics and functional genomics study.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».