Measurement of nitric oxide in murine Hepatoma Hepa1c1c7 cells by reversed phase HPLC with fluorescence detection.
Notice bibliographique
Résumé
PURPOSE: Nitric oxide (NO) is produced by various cell types in picomolar to nanomolar range and has important roles in a variety of biological functions. The aim of the present study was to investigate a sensitive and reproducible fluorometric HPLC method for measuring nitrite, one of the stable oxidation products of nitric oxide, in murine hepatoma Hepa 1c1c7 cells. METHODS: Hepa 1c1c7 cells were incubated with vehicle or recombinant murine tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha, 10 ng/ml) in Hanks' balanced salt solution (HBSS) for 10 hours. Thereafter, the HBSS medium was collected for nitrite analysis. NO production was examined by measuring the conversion of 2, 3-diaminonaphthalene (DAN) to its fluorescent product, 2, 3-naphthotriazole (NAT). NAT was analyzed after elution with 60% of 15 mM sodium phosphate buffer (pH = 7.5) and 40% methanol through a 10-microm reversed-phase C18 column (250 x 4.00 mm, I.D.) at a flow rate of 1 ml /min. Fluorescence was monitored with excitation at 375 nm and emission at 415 nm. RESULTS: NAT appeared in approximately 16 min with no interference peaks. The assay yielded linear response within the examined range of 10 - 200 pM (r(2) >0.99) with an intra and inter-day variability of <10 % and accuracy of > 90%. The detection limit for nitrite was 10 pM. NO production by TNF- alpha treated Hepa 1c1c7 cells is estimated to be approximately 2 folds more than untreated cells. CONCLUSION: This fluorometric HPLC assay offers a sensitive and reliable measurement of NO production in cell culture medium.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».