A novel, radiolabel-free pulse chase strategy to study Kir3 channel ontogeny
Pourquoi ce travail est dans la base
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Notice bibliographique
Résumé
Kir3 channels are essential regulators of cellular excitability, maintaining cells at resting membrane potentials. While much research has been dedicated to elucidating the mechanisms regulating Kir3 channel gating, little is known regarding the channel's early associations with signaling partners, its stability at the plasma membrane or mechanisms regulating its internalization and degradation. To address these issues we have established an inducible Kir3.1 cell line that allows monitoring of a discrete "pulse" of channel as it progresses along the biosynthetic pathway. Using this system, we have been able to track Kir3 maturation and the influence of partner subunits on Kir3 lifetime and stability. Of note, we show that Kir3.1, in the absence of trafficking partner subunits, can exit the endoplasmic reticulum (ER) and reach the Golgi (though not the plasma membrane), and that expression of Kir3.3 subunits drastically reduced levels of Kir3.1 in the cell. We also show that interfering with trafficking from the ER to Golgi has a pronounced inhibitory effect on Kir3.1-Kir3.2 interactions, suggesting that this complex is stabilized either en route to the Golgi or in the Golgi itself. Finally, we showed that the Kir3 channel can reach the cell surface as early as 6 h post-induction and that removal of cell surface-localized channel occurs within 48 h. This system can be adapted to study the life cycle of any cellular protein without the confounds associated with radioactive labeling or the complications noted with expressing supraphysiological levels of proteins.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle