Ectopic Expression of Arabidopsis Phospholipase A Genes Elucidates Role of Phospholipase Bs in S. cerevisiae Cells
Notice bibliographique
Résumé
In S. cerevisiae neither disruption of the phospholipase B triple knockout mutant (plb1plb2plb3; plb123) nor over-expression of phospholipase Bs (PLBs) result in a phenotype different from wild type. In performing experiments to characterize candidate plant phospholipase (PLA) genes, we found, surprisingly, that ectopic expression of either of two different A. thaliana PLA2 or PLA1 genes in the yeast plb123 mutant completely inhibited cell growth. We proposed that while PLBs might not be essential for growth and metabolism of yeast cells, they may play an important role in cell survival by metabolizing excess intracellular lysophospholipids. To test our hypothesis, we overexpressed a plant phospholipase A2 (PLA2) in both WT and plb123 cells, producing a pool of lysophosphatidylcholine (lysoPtdCho) in both transformants. In ¹⁴C acetate labeling experiments, WT cells were able to catabolize the resultant labeled lysoPtdCho, preventing accumulation, and the cells grew normally. In contrast, in the triple plb123 mutant PLA2 transformant, lysoPtDCho accumulated more than 4-fold to a toxic level, inhibiting cell growth. However, this growth inhibition was complemented by co-expression of either PLB1, PLB2 or PLB3 in the plb123 triple mutant already expressing the plant PLA2. Furthermore, in labeling experiments, the rescued cells exhibited a 60-75% reduction in 14C-lysoPtdCho build-up compared to plb123PLA2 cells. Our data provides conclusive evidence that yeast PLBs can metabolize intracellular lysoPtdCho produced by plant PLA2 overexpression in yeast. Our experiments indicate the utility of ectopic plant phospholipase A gene expression to characterize poorly-understood phospholipid metabolism mutants in yeast or other organisms.
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Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».