Dimerization and DNA binding of the Salmonella enterica PhoP response regulator are phosphorylation independent
Notice bibliographique
Résumé
In Salmonella enterica, PhoP is the response regulator of the PhoP/PhoQ two-component regulatory system that controls the expression of various virulence factors in response to external Mg2+. Previous studies have shown that phosphorylation of a PhoP variant with a C-terminal His tag (PhoP(His)) enhances dimerization and binding to target DNA. Here, the effect of phosphorylation on the oligomerization and DNA binding properties of both wild-type PhoP (PhoP) and PhoP(His) are compared. Gel filtration chromatography showed that PhoP exists as a mixture of monomer and dimer regardless of its phosphorylation state. In contrast, unphosphorylated PhoP(His) was mostly monomeric, whereas PhoP(His) approximately P existed as a mixture of monomer and dimer. By monitoring the tryptophan fluorescence of the proteins and the fluorescence of the probe 1-anilinonaphthalene-8-sulfonic acid bound to them, it was found that PhoP and PhoP(His) exhibited different spectral properties. The interaction between PhoP or PhoP(His) and the PhoP box of the mgtA promoter was monitored by surface plasmon resonance. Binding of PhoP to the PhoP box was barely influenced by phosphorylation. In contrast, phosphorylation of PhoP(His) clearly increased the interaction of PhoP(His) with target DNA. Altogether, these data show that a His tag at the C-terminus of PhoP affects its biochemical properties, most likely by affecting its conformation and/or its oligomerization state. More importantly, these results show that wild-type PhoP dimerization and interaction with target DNA are independent of phosphorylation, which is in contrast to the previously proposed model.
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Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».