Characterization of Recombinant Human PRG4 as an Ocular Surface Boundary Lubricant
Notice bibliographique
Résumé
Introduction : Dry-eye disease involves tear film instability that can result in surface-to-surface contact between the cornea and eyelid or contact lens, where boundary lubrication can be dominant1. Motivated by the recent discovery that proteoglycan 4 (PRG4, a mucin-like glycoprotein originally discovered in synovial fluid as a boundary lubricant2), functions as an ocular surface boundary lubricant3, advances in recombinant protein expression technology4, and PRG4’s potential use as a friction-reducing contact lens coating, the objectives of this study were to: 1) biochemically characterize recombinant human PRG4 (rh- PRG4); and 2) assess the boundary lubricating properties of rh-PRG4, both before and after autoclave sterilization, at a cornea-contact lens material (PDMS) biointerface. Methods : SDS-PAGE western blot analysis using a variety of anti-PRG4 antibodies and lectins was performed on native PRG4 (nPRG4) and rh-PRG4 samples, both nonreduced and reduced, with and without enzymatic removal of O-linked glycosylations. Human corneas and PDMS were articulated against each other, subject to physiological loads of 8-25 kPa, at effective sliding velocities of 0.3-30 mm/s. Test lubricant sequences were A) saline, rh-PRG4 @300μg/mL, nPRG4 @300μg/mL, and saline; and B) saline, autoclaved rh-PRG4 @300μg/mL, rh-PRG4 @300μg/mL, and saline. Static and kinetic coefficients of friction were calculated. Results : rh-PRG4 demonstrated similar immunoreactivity to nPRG4, and effectively lowered friction at the cornea-PDMS biointerface. Western blotting indicated immunoreactive rh-PRG4 bands had a similar apparent molecular weight (MW) to nPRG4, and decreased appropriately upon reduction as well as enzymatic removal of glycosylations. Kinetic friction coefficients, which were highest in saline (0.31±0.06 to 0.40±0.06, mean±SEM), were similar in rh-PRG4 (0.12±0.01 to 0.25±0.03) and nPRG4 (0.19±0.02 to 0.28±0.03) across all velocities. Autoclaved rh-PRG4 had similar values to rh-PRG4 as well (0.19±0.02 to 0.26±0.04, 0.16±0.02 to 0.26±0.02, respectively). Conclusions : rh-PRG4 demonstrates similar biochemical and ocular surface lubricating properties to nPRG4, and may function as an effective friction-reducing contact lens coating.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».