Human Plasma Membrane Anion Exchanger, AE1: Over‐expression in <i>Saccharomyces cerevisiae</i>
Notice bibliographique
Résumé
Anion exchanger 1 (AE1) facilitates the exchange of chloride for bicarbonate across the plasma membrane of renal and erythrocyte membranes. The 55 kDa membranedomain of AE1 alone is responsible for its transport function, however a high resolution structure of this domain has not been solved. The limiting factor to obtaining acrystal structure is the availability of homogenous, purified AE1. Here we developed a novel expression and efficient purification system for AE1, using S. cerevisiae to allow for large‐scale expression, while maintaining proper folding of AE1. The expression construct consists of the AE1 membrane domain (AE1MD), residues 388–911 of human AE1, followed by the 9 C‐terminal amino acids of rhodopsin. Expression was under the control of the constitutive promoter and transcriptionalterminator of the yeast H + ‐ATPase gene. AE1MD was expressed in S. cerevisiae, strain BJ5457, to 0.3 mg AE1MD per litre of culture. We characterized the cellularlocalization of AE1MD by confocal immunofluorescence microscopy and sucrose gradient ultracentrifugation. AE1MD structure was assessed by binding to animmobilized anion exchange inhibitor (SITS‐Affi‐gel). Once solubilized by the detergent n‐dodecyl‐β‐D‐maltoside, AE1MD was purified with a 1D4 antibody affinitycolumn, which recognizes the rhodopsin tag on AE1MD. This research is supported by the Canadian Institutes of Health Research.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».