Generation Of Cell-Penetrating Heme Oxygenase Proteins To Improve The Resistance Of Steatotic Livers To Reperfusion Injury Following Transplantation
Notice bibliographique
Résumé
Liver transplantation is the only life-saving treatment for patients with end-stage liver\ndisease; however, organ availability is insufficient to meet demands. Steatotic livers are\nextended criteria donor (ECD) organs that could be used for transplantation if not for an\nincreased susceptibility ischemia reperfusion injury (IRI). Heme oxygenase-1 is a gene,\nthat when upregulated has be shown to reduce IRI in animal models of transplantation.\nIncreasing HO-1 activity in steatotic livers by delivery of a functional cell-penetrating\nHO-1 protein (through the use of cell-penetrating peptides) may provide protection\nagainst IRI, making these organs useful for transplantation. The purpose of this thesis\nwas the generation and testing of a cell-penetrating HO-1 protein. HO-1 and EGFP gene\nsequences were cloned into the pET-28B(+) vector in frame with a CPP or TAT\nsequence. Resulting plasmids were cloned into E. coli, and protein expression was\ninduced using IPTG. Proteins were purified using Ni-NTA affinity chromatography\nunder denaturing and non-denaturing conditions. Non-denatured proteins were tested for\nHO-1 activity and the ability of both denatured and non-denatured proteins to transduce\ncells in vitro was tested by fluorescence microscopy. The cell-penetrating ability of nondenatured\nproteins was further tested in J774, HepG2 and HUVEC cells using\nimmunofluorescence. Five HO-1 and two EGFP cell-penetrating proteins were generated\nexpressed and purified successfully. Purified non-denatured HO-1 retains its enzymatic\nactivity. Non-denatured CPP-EGFP and CPP-HO1 penetrated cells more effectively than\ntheir denatured counterparts. CPP-EGFP and CPP-HO1 proteins are able to penetrate\nmultiple cell types in vitro. Successful generation and testing of a cell-penetrating HO-1\nprotein, for use in an animal model of steatotic liver transplantation. This protein\ndemonstrates promise for use as a potential therapeutic agent in the field of liver\ntransplantation.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».