Abstract 571: A Novel High-Throughput Whole Blood Immuno-Counting Assay is Useful in the Assessment of Platelet Responses to Antiplatelet Therapy
Notice bibliographique
Résumé
Background: The current gold standard in platelet function testing, light transmission aggregometry, is time- and labor-intensive, and uses platelet-rich plasma which makes it sub-optimal for high throughput testing. In order to reduce blood manipulation prior to platelet function testing and to study multiple platelet activation pathways simultaneously, we have developed a 96-well plate-based assay carried out in whole blood, where aggregation is measured as a decrease in the number of fluorescently-labeled single platelets by flow cytometry. Aim: To investigate whether a 96-well plate-based whole blood assay can be used to assess platelet function. Methods: Platelet function in response to 5 concentrations of lyophilized arachidonic acid (AA), ADP, collagen, epinephrine, TRAP, U46619, and ristocetin, was assessed in healthy volunteers (n=20) to establish normal ranges. The effect of antiplatelet drugs was assessed in vitro by incubation with aspirin (100 μM), cangrelor (1 μM) or both (n=20), and in patients on dual antiplatelet therapy (n=20). After addition of 40 μl of whole blood per well, the plate was shaken for 5 min at 1000 rpm at 37°C; a fixative solution (Platelet Solutions, Nottingham) was applied to stop platelet aggregation and allow analysis in a central laboratory. Fixed whole blood samples (stable for up to 9 days) were labeled with FITC-conjugated CD42a and assessed by flow cytometry. Aggregation was calculated as (Platelet count in vehicle-treated sample - Platelet count in agonist-stimulated sample) / Platelet count in vehicle-treated sample x 100. Results: Dose-response curves were readily assessable for all agonists and intra-individual variability was minimal in healthy volunteers (CV<10%). In vitro addition of aspirin alone resulted in inhibition of AA- and collagen-induced aggregation, whereas cangrelor induced a shift in dose-response to most agonists in addition to profound inhibition of ADP responses. In patients on dual antiplatelet therapy, the pattern of response was consistent with the results obtained with in vitro agents. Conclusions: A 96-well plate-based whole blood assay with a minimal blood volume requirement (<2 ml) could be used to provide a global portrait of platelet responses to antiplatelet agents.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,007 | 0,005 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».