Regulation of AGS3 and Gialpha1 interaction in living cells
Notice bibliographique
Résumé
Activator of G Protein Signaling 3 (AGS3) and related GPR proteins provide unexpected regulatory mechanisms for G‐protein signaling systems. AGS3 contains 4 GPR motifs, each of which can serve as a docking site for Giα‐GDP free of Gβγ. Two of the key questions for AGS3 is what controls its interaction with G‐protein and where does this interaction occur within the cell. As an initial approach to this question, we evaluated the interaction of AGS3 with Giα1 in living cells using bioluminescence resonance energy transfer (BRET) to measure interaction between proteins tagged with Renilla luciferase (RLuc) and the YFP‐variant Venus in HEK cells. AGS3 and Giα1 reciprocally tagged with either RLuc or YFP exhibited a BRET signal that was saturable and specific. The net BRET signal was blocked by Gβγ expression and it was not observed with the AGS3‐Q/A mutant in which each of the GPR motifs are rendered incapable of binding Giα. BRET was observed with AGS3‐YFP and Giα1‐RLuc or with AGS3‐RLuc and Giα1‐YFP pairs. The latter donor and acceptor pair exhibited a significantly stronger net BRET signal potentially reflecting the assembly of a Giα1‐YFP acceptor on each of the four GPR docking sites in an individual AGS3‐RLuc molecule. These data indicate a robust interaction of GPR proteins and Giα1 in the living cell and provide a platform to determine how this interaction is regulated and where it occurs within the cell.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».