Characterization of novel regulatory components in the dynamic protein palmitoylation cycle
Notice bibliographique
Résumé
Protein palmitoylation represents the only reversible lipid modification in the cell. As a post-translational modification, it is highly dynamic and plays an important role in protein trafficking and localization. Two families of enzymes mediate dynamic palmitoylation: palmitoyl-acyl transferases (PATs) catalyze palmitate addition, and acyl-protein thioesterases (APTs) catalyze palmitate removal. In mammalian cells, twenty-three PATs have been identified; however, the mechanisms that regulate their enzymatic activity are largely unexplored. Only two APTs, APT1 and APT2, have been identified, but it is unclear if these enzymes act constitutively on all palmitoylated proteins, or if additional depalmitoylases exist. To determine if APT1 and APT2 are responsible for the depalmitoylation of all cytosolic substrates, in this dissertation, I first examined the roles of APT1 and APT2 in protein depalmitoylation. Using a dual pulse-chase strategy to compare protein and palmitate half-lives, I found that simultaneous knockdown or inhibition of APT1 and APT2 strongly blocked palmitate removal from the N-terminal domain of Huntingtin (N-HTT), but had no effect on the depalmitoylation of post-synaptic density-95 (PSD-95). By activity-based protein profiling (ABPP), I showed that the APT1/2 inhibitor Palmostatin B has additional serine hydrolase targets that may play a role in PSD-95 depalmitoylation. Moreover, Palmostatin B induced PSD-95-GFP re-distribution in COS-7 cells, a phenotype not observed with APT1- and APT2-selective inhibitors. These results demonstrate that serine hydrolases other than APT1 and APT2 mediate the substrate-specific removal of palmitate from cytosolic proteins. I also investigated a possible novel regulator of the PAT HTT-interacting protein 14 (HIP14), Optineurin (OPTN), a cargo adaptor known to interact with HTT to mediate post-Golgi vesicle trafficking. I validated this interaction by co-immunoprecipitation and showed that OPTN is not a palmitoylated substrate. Furthermore, HIP14, OPTN, and HTT formed a trimeric complex. I mapped the binding of OPTN and HTT to the HIP14 ankyrin repeat domain, and identified mutations that selectively destabilized the HIP14/OPTN interaction. I hypothesize that OPTN transports HIP14 to distinct subcellular compartments to regulate its access to substrates. In summary, these results reveal potential novel regulatory components in the dynamic palmitoylation cycle.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».