A simple and fast method for the isolation of mouse lymphoid progenitors from bone marrow (36.6)
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Lymphocytes are derived from hematopoietic stem cells through an important developmental intermediate called a common lymphoid progenitor (CLP). CLPs are defined as Lin−IL-7Rα+c-KitloSca-1lo. They can differentiate into T, B, and natural killer (NK) cells but lack myeloid and erythroid potential. Study of lymphocyte development largely relies on access to this rare cell population. Fluorescence-activated cell sorting (FACS) commonly used to isolate CLPs is costly, time-consuming and perhaps most importantly detrimental to the cell viability and function. We describe a fast and efficient method for the isolation of CLPs from mouse bone marrow (BM). This method is based on immunomagnetic, column-free cell separation technology (EasySep). Using this method, lineage positive cells were first depleted by cross-linking them to magnetic particles using biotinylated antibodies. Next, IL-7Rα+ cells were positively selected from the Lin−/lo population. Purity of Lin−IL-7Rα+c-Kit+ lymphoid progenitors as assessed by flow cytometry ranged from 18-41%. Limiting dilution analysis of the EasySep enriched cells showed increased frequencies of B cell (1:25), T cell (1:6) and NK cell (1:49) progenitors as compared to non-depleted control BM. This system introduces a rapid and easy method for the enrichment of rare CLPs with greater yield than cell sorting and good viability. This will enable research in the field of cellular, molecular and developmental immunology.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,002 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,007 | 0,008 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».