Applications of capillary electrophoresis - mass spectrometry interfaced by a flow-thourgh microvial electrospray ionization sprayer
Notice bibliographique
Résumé
Capillary electrophoresis – electrospray ionization – mass spectrometry (CE-ESI-MS) combines the superior separation capability of CE and detection and characterization ability of MS. Different CE separation modes can be coupled to ESI-MS, employing an interface with a flow-through microvial. In the first part of the thesis, recent development of CE and CE-MS applications in the analysis of complex samples are reviewed. Capillary isoelectric focusing (cIEF) is an important tool for the separation and characterization of amphoteric molecules based on isoelectric points. Minute structural changes on a large protein can result in changes in isoelectric point, and the changes can be detected by slab gel isoelectric focusing or capillary isoelectric focusing. A systematic study on the interactions among carrier ampholytes, sample media and capillary inner coatings was carried out to provide guidelines for choosing feasible combinations that can achieve isoelectric focusing and successful chemical mobilizations. Within the 0.1%-1% (w/v) carrier ampholytes concentration range, small forward EOFs will ensure a higher chance of good focusing and successful electrophoretic mobilization, while a negative EOF will hinder these processes. Feasible combinations of experimental conditions are summarized. Using the optimized conditions, we reported the direct observation of the shape of focused ampholyte bands in the cIEF process by online cIEF- ESI-MS. The ampholyte bands directly detected by MS have the potential to enable a more accurate pI determination for unknown amphoteric molecules. Immunoglobulin G from rabbit serum is used to demonstrate this possibility. In Chapter 6, a CE-MS method was developed to monitor the concentration variations of major nutrients and/or metabolites in human embryonic stem cell CA1S culture medium over a culturing cycle. Concentration changes for nutrients and/or metabolites in the culturing media provided information on the cell growth behavior without destructing living cells. In the last part of the thesis, an atmospheric ion lens was applied to the flow-through microvial CE-ESI-MS interface to improve the electrospray ionization and sampling efficiency. A mixture of amino acids was tested to show the increased signal-to-noise ratios. The atmospheric ion lens also gives more flexibility when choosing the EOF and chemical modifier flow rates.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,003 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,002 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».