Rapid Enumeration of Phage in Monodisperse Emulsions
Notice bibliographique
Résumé
Phage-based detection assays have been developed for the detection of viable bacteria for applications in clinical diagnosis, monitoring of water quality, and food safety. The majority of these assays deliver a positive readout in the form of newly generated progeny phages by the bacterial host of interest. Progeny phages are often visualized as plaques, or holes, in a lawn of bacteria on an agar-filled Petri dish; however, this rate-limiting step requires up to 12 h of incubation time. We have previously described an amplification of bacteriophages M13 inside droplets of media suspended in perfluorinated oil; a single phage M13 in a droplet yields 10(7) copies in 3-4 h. Here, we describe that encapsulation of reporter phages, both lytic T4-LacZ and nonlytic M13, in monodisperse droplets can also be used for rapid enumeration of phage. Compartmentalization in droplets accelerated the development of the signal from the reporter enzyme; counting of "positive" droplets yields accurate enumeration of phage particles ranging from 10(2) to 10(6) pfu/mL. For enumeration of T4-LacZ phage, the fluorescent signal appeared in as little as 90 min. Unlike bulk assays, quantification in emulsion is robust and insensitive to fluctuations in environmental conditions (e.g., temperature). Power-free emulsification using gravity-driven flow in the absence of syringe pumps and portable fluorescence imaging solutions makes this technology promising for use at the point of care in low-resource environments. This droplet-based phage enumeration method could accelerate and simplify point-of-care detection of the pathogens for which reporter bacteriophages have been developed.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».