PKCε Regulates Contraction-Stimulated GLUT4 Traffic In C2C12 Skeletal Muscle Cells
Notice bibliographique
Résumé
The signaling pathways that stimulate glucose uptake in response to muscle contraction are not well defined. We recently established an in vitro cellular model to study GLUT4 traffic using nicotinic acetylcholine receptor-mediated contraction of cultured C2C12 skeletal muscle myotubes expressing a myc-tagged GLUT4 (GLUT4myc) reporter (Niu W., et al AJP-Endocrinol Metab 298:E1058-1071). We osbserved the cell-surface increase of GLUT4 was stimulated by carbachol and sensitive to inhibition by ·-bungarotoxin and not atropine and only partly required AMPK activation. PURPOSE: To search for AMPK-independent pathways which regulate contraction-stimulated GLUT4 traffic. METHODS: C2C12 myotubes were treated siRNA targeting PKCε (72 h) or with chemical inhibitors of novel and/or conventional PKC or a peptidic myristoylated translocation inhibitor (Myr- EAVSLKPT) of PKCε (30 min) prior to 20 min stimulation with the acetylcholine analog, carbachol (100 μM), followed by measurement of cell-surface GLUT4myc levels, signal transduction or membrane translocation of PKC isoforms. RESULTS: Cell surface carbachol-induced GLUT4myc levels were partly inhibited by the conventional/novel PKC inhibitors GF-109203X, Gö6983, and Ro-31-8425 but not by the conventional PKC inhibitor Gö6976. However, PMA-stimulated GLUT4myc traffic to the cell surface was fully inhibited by the novel/conventional PKC inhibitors. C2C12 myotubes express several novel isoforms of PKC with PKCδ and PKCε in greatest abundance. Carbachol stimulated the PKC phosphorylation of and translocation of PKCδand PKCε to membranes from the cytosol within 5 min. However, only a peptidic inhibitor of PKCε translocation, but not one of PKCδ(Myr-SFNSYELGSL), prevented the GLUT4myc response to carbachol. Lastly, siRNA-mediated PKCε protein knockdown inhibited the carbachol-induced gain of GLUT4myc at the cell surface by approximately 50%. CONCLUSIONS: PMA-stimulated GLUT4myc traffic to the cell surface provided proof-of-concept that PKC can regulate GLUT4 traffic. Our findings with carbachol-induced contractions of C2C12 myotubes, supports a role for novel PKC isoforms, especially PKCε, in contraction-stimulated GLUT4 traffic in muscle cells. Supported by a joint grant from CIHR-NSFC to AK (# FRN-82420) and WN (# 30611120532) and by a NSFC grant (# 30570912) to WN.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».