Producing megakaryocytes from a human peripheral blood source
Notice bibliographique
Résumé
BACKGROUND: Cultured megakaryocytes could prove useful in the study of human diseases, but it is difficult to produce sufficient numbers for study. We describe and evaluate the use of an expansion process to develop mature megakaryocytes from peripheral blood-derived human hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs). STUDY DESIGN AND METHODS: HSPCs (CD34+) were isolated from peripheral blood by positive selection and expanded using an optimal CD34+ expansion supplement. We evaluated megakaryocyte growth, maturation, and morphology in response to thrombopoietin (TPO) stimulation using flow cytometry and electron microscopy. TPO demonstrated a dose-dependent stimulatory effect on both megakaryocyte number and maturation. RESULTS: From 90 to 120 mL of unmanipulated peripheral blood, we isolated a mean of 1.5 × 10(5) HSPCs (1.5 × 10(3) cells/mL of whole blood). HSPCs expanded nine-fold after a 4-day culture using an expansion supplement. Expanded cells were cultured for an additional 8 days with TPO (20 ng/mL), which resulted in a 2.9-fold increase in megakaryocytic cells where 83% of live cells expressed CD41a+, a marker of megakaryocyte commitment, and 50% expressed CD42b+, a marker for megakaryocyte maturation. The expanded HSPCs responded to TPO stimulation to yield more than 1.0 × 10(6) megakaryocytes. This cell number was sufficient for morphologic studies that demonstrated these expanded HSPCs produced mature polyploid megakaryocytes capable of forming proplatelet extensions. CONCLUSIONS: Peripheral blood HSPCs can be expanded and differentiated into functional, mature megakaryocytes, a finding that supports the use of this process to study inherent platelet (PLT) production disorders as well as study factors that impair normal PLT production.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».