Assessment of Mitochondrial Metabolic Oxidative State in Living Cardiomyocytes with Cardiomyocyte Autofluorescence
Notice bibliographique
Résumé
Objective: To study fingerprinting of mitochondrial metabolic oxidative state in living cardiomyocytes with cadiomyocyte autofluorescence(AF) in order to monitor cellular fluorescence of nicotinamide adenine dinucleotide(phosphate)[NAD(P)H],the principal electron donor in mitochondrial respiration which is responsible for vital ATP supply to sensitively and reflects early signs of mitochondrial function in pathophysiological conditions,such as ischemia,diabetes and heart failure.Methods: NAD(P)H was studied as a marker for non-invasive fluorescent probing of the mitochondrial function.NAD(P)H fluorescence was recorded in living cardiomyocytes following excitation with 375 nm UV-light and detection by spectrally-resolved time-correlated single photon counting(TCSPC),based on the simultaneous measurement of the fluorescence spectra and fluorescence lifetimes.Modulation of mitochondrial respiration was tested by studying dynamic characteristics of NAD(P)H fluorescence decay in living cardiomyocytes.Results: At least a 3-exponential decay model,with 0.4-0.7 ns,1.2-1.9 ns and 8.0-13.0 ns lifetime pools was necessary to describe cardiomyocyte AF within 420-560 nm spectral range.Rotenone,the inhibitor of Complex Ⅰ of the mitochondrial respiratory chain,increased AF intensity and shortened the average fluorescence lifetime.Dinitrophenol(DNP),an uncoupling agent of the mitochondrial oxidative phosphorylation,lowered AF intensity,broadened the spectral shoulder at 520 nm and increased the average fluorescence lifetime.These effects were comparable to the changes in the concentration and in the rate of dehydrogenation of NADH in vitro.Conclusion: Spectrally-resolved fluorescence lifetime technique provides promising new tool for analysis of mitochondrial NAD(P)H fluorescence with good reproducibility in living cardiomyocytes.This approach will enhance our knowledge about cardiomyocyte oxidative metabolism and/or its dysfunction at a cellular level.In the future,this approach can prove helpful in the clinical diagnosis and treatment of mitochondrial disorder.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».