Preparation and Assay of Myristoyl-CoA:Protein N-Myristoyltransferase
Notice bibliographique
Résumé
Myristoyl-CoA:protein N-myristoyltransferase (NMT) catalyzes the cotranslational transfer of myristate from myristoyl-CoA to the amino-terminal glycine residue of a number of cellular, viral, fungal, and oncoproteins (1–5). These proteins include the catalytic subunit of cAMP-dependent protein kinase, various tyrosine kinases (including pp60src, pp60yes, pp56lck, pp59fyn/syn, and cAbl), the β-subunit of calmodulin-dependent protein phosphatase (calcineurin), the myristoylated alanine rich C kinase substrate, the α-subunit of several G-proteins, and several ARF proteins involved in ADP ribosylation (1–5). A significant problem with the purification and characterization of NMT concerns the available assay procedures. The wide availability and use of peptides allow for convenient substrates. However, the existing procedures to isolate and analyze the reaction products of myristoylation, such as reverse-phase HPLC, are expensive and time-consuming (6,7). Ion-exchange column chromatography, differential solubilization, adsorption of myristoyl-CoA to acidic alumina, and ion-exchange exclusion of [3H]myristoyl peptides have been utilized as assay methods are faster and more convenient than reverse-phase HPLC (8–10). However, these procedures are still limited with respect to the number of assays that can conveniently be performed. Here we described a new rapid, reliable, and inexpensive NMT assay based on the binding of [3H]myristoyl-peptide to a P81 phosphocellulose paper matrix (11).
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».