Characterization of a cyclodextrinoligonucleotide complex by capillary electrophoresis using laser-induced fluorescence.
Notice bibliographique
Résumé
PURPOSE: Cyclodextrins (CDs) have been identified as a viable alternative to viral vectors for use in therapeutic applications. Here, the stability of the complex formed between the a multiply charged, cationic, fully substituted heptakis-(6-amino-2-galactosyl)cyclodextrin (BCDX12) with a multiply charged 12-mer hexachlorofluorescein tagged arabinopolynucleotide (Hex-PAH) have been evaluated. METHODS: The stability of complexes of Hex-PAH and BCD-X12 was studied with respect to mole ratio (1:1, 1:2, and 1:5 Hex-PAH:BCD-X12), pH, buffer concentration, temperature, and agitation using capillary electrophoresis with laser induced fluorescence detection (CE/LIF). Two neutral CDs and an additional cationic CD were also tested under the same analytical conditions to determine their ability to form complexes. RESULTS: Hex-PAH:BCDX12 complexes at mole ratios of 1:2 were stable in 10 mM (160 mM total borate concentration) sodium tetraborate buffer at pH 7.5 and at temperatures of 4 degrees C and 25 degrees C over 48 hours. However, the Hex-PAH:BCD-X12 complex was less stable at 37 degrees C and at higher buffer concentrations and pH values. Strong vortex mixing prior to analysis was found to disrupt the complex. Of the four CDs tested for their ability to complex with Hex-PAH, only BCDX12 formed stable complexes with Hex-PAH under the test conditions. CONCLUSIONS: Capillary electrophoresis was found to be well suited to test the stability of cyclodextrin-nucleotide complexes. CE/LIF indicated that only a single Hex- PAH:BCD-X12 complex was formed at all formulation ratios, and that the complexes were electrophoretically identical to each other, and increasing the molar ratio beyond 1:2 did not contribute measurably to complex stability. Storage temperature and agitation conditions were found to influence complex stability. Since no stable complexes were formed with neutral cyclodextrins, the results support the hypothesis of a 'charge associated' complex rather than an inclusion complex, although inclusion complexes cannot be excluded on the basis of these studies.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».